Identificación de proteínas con reactivo de Biuret

¿Cómo identificas a las moléculas de las proteínas? Vamos a descubrirlo en esta práctica.

Observación

Las proteínas son moléculas formadas por cadenas de aminoácidos que están unidos por un tipo de enlace conocido como enlace peptídico. Por sus propiedades físicoquímicas, las proteínas se pueden clasificar en proteínas simples, formadas sólo por aminoácidos o sus derivados; proteínas conjugadas, formadas por aminoácidos acompañados de sustancias diversas, y proteínas derivadas sustancias formadas por desnaturalización y desdoblamiento de las anteriores.

Introducción 

La reacción o prueba de Biuret es un método que detecta la presencia de compuestos  de tres o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las proteínas y péptidos cortos. El reactivo de Biuret consiste en una solución acuosa de sulfato cúprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un ensayo positivo con los enlaces peptídicos entre aminoácidos, cuando la solución queda de color violeta. Esto se debe a que el cobre tiene la propiedad de formar iones complejos, especialmente entre los enlaces peptídicos.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopía ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el ion Cu2+).

Hipótesis

La prueba de Biuret será positiva en la clara de huevo, la leche y la milanesa, estos tres alimentos se encuentran formados por proteínas de gran complejidad, como la albúmina y la caseína. Sin embargo, al calentarse, las proteínas se desnaturalizan, por lo tanto, la reacción podría no llevarse a cabo. 

Experimentación

Materiales

• tubos de ensayo o falcon de 15ml
• reactivo de biuret
• gotero
• clara de huevo 
• 50ml de leche
• 50 gr de milanesa o carne magra (cruda)

Procedimientos 

1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo, leche y un trozo de carne cruda. 
2. Colocar en cada tubo de ensayo 10 gotas del reactivo de biuret. 
3. Observar la coloración de la muestra. 

Resultados 

Las cadenas de proteínas presentes en la clara de huevo, la leche y la milanesa, cuando fueron sometidas al reactivo de Biuret, que en su composición tiene NaOH al 10% (el cual no participa de la reacción pero es de fundamental importancia su presencia ya que proporciona el medio básico necesario) junto con el CuSO4, reaccionan con el sulfato cúprico y se tornan de color violeta lo que nos indica que la reacción fue positiva.

Bibliogafía (en formato APA):

Alba Gutiérrez R., Eufrosina, Olivia Rodríguez Zavala, Catalina Carmona T.. (2004). La química en tus manos. Ciudad de México: Dirección General de Publicaciones y Fomento Editorial. Recuperado de: https://books.google.com.mx/books?id=SPERRV5OggUC&pg=PA183&dq=practica+carbohidratos+lugol&hl=es-419&sa=X&ved=2ahUKEwjMkMrT3Z3sAhUMP60KHYypBvoQ6AEwAnoECAEQAg#v=onepage&q=practica%20carbohidratos%20lugol&f=false

Jorge E. Ramírez Luna, Andrea Reyes López . (2003). Manual de prácticas de laboratorio de biología. México: Pearson Educación . Recuperado de: https://books.google.com.mx/books?id=xBxiLyO2uYEC&pg=RA1-PA20&dq=practica+carbohidratos+lugol&hl=es-419&sa=X&ved=2ahUKEwjMkMrT3Z3sAhUMP60KHYypBvoQ6AEwBHoECAUQAg#v=onepage&q&f=false